Zmniejszona wrażliwość Streptococcus pneumoniae na fluorochinolony w Kanadzie ad

Data pobrania, źródło okazu oraz wiek i płeć pacjenta zostały zapisane na standardowej formie. Duplikaty izolatów od tego samego pacjenta zostały wykluczone. Izolaty transportowano na skosach lub wymazach z czekolady do centralnego laboratorium. Po otrzymaniu, potwierdzono, że izolaty są S. pneumoniae standardowymi metodami. Po przechowywaniu w temperaturze -70 ° C izolaty rozmrożono i podhodowano na agarze z krwią dwa razy przed wykonaniem testów wrażliwości. Badanie wrażliwości in vitro wykonano za pomocą mikrorozcieńczenia bulionu zgodnie z wytycznymi Narodowego Komitetu Klinicznych Standardów Laboratoryjnych.18 W celu określenia minimalnego stężenia hamującego (MIC) dla każdego izolatu badano następujące stężenia środków przeciwdrobnoustrojowych (w mikrogramach na mililitr) , przy użyciu rozcieńczeń podwójnych: penicyliny G, 0,03 do 8; cyprofloksacyna, 0,06 do 64; gatifloksacyna, od 0,06 do 32; grepafloksacyna, 0,06 do 32; lewofloksacyna, 0,06 do 64; sparfloksacynę, od 0,06 do 64; trovafloxacin, 0,06 do 32; moksyfloksacyna, 0,03 do 32; gemifloksacyna, 0,03 do 32; erytromycyna, 0,12 do 16; klindamycyna, 0,25 do 16; tetracyklina, do 32; trimetoprim-sulfametoksazol, 0,25 do 128 (składnik trimetoprymowy); i chloramfenikol, 2 do 16. Środki przeciwdrobnoustrojowe były dostarczane przez ich producentów.
Pneumokoki ze zmniejszoną podatnością na fluorochinolony zdefiniowano jako te, dla których MIC cyprofloksacyny wynosiło co najmniej 4 .g na mililitr. Ten stopień oporności jest związany z mutacjami w regionach determinujących oporność na fluorochinolony genów kodujących topoizomerazę DNA IV (parC) i gyrazę DNA A (gyrA). [14, 17, 17] Ponadto, ten MIC jest wyższy niż zwykle szczytowe stężenie w surowicy w surowicy. cyprofloksacyna. Izolaty sklasyfikowano jako wrażliwe na penicylinę (MIC, . 0,06 .g na mililitr), o pośredniej podatności na penicylinę (MIC,> 0,06 do <2,0 .g na mililitr) lub oporne na penicylinę (MIC, .2,0 .g na mililitr). Standardy interpretacyjne MIC w Krajowym Komitecie Klinicznych Standardów Laboratoryjnych wykorzystano również do zaklasyfikowania izolatów pneumokoków jako wrażliwych, o średniej podatności lub oporności na inne testowane środki przeciwdrobnoustrojowe.18 Ze względu na stosunkowo niewielką liczbę izolatów w 1993 i 1998 r., niektóre miejsca zgłaszają połączone dane za lata 1993 i 1994 oraz za lata 1997 i 1998.
Wszystkie izolaty z MIC cyprofloksacyny o wielkości co najmniej 4 .g na mililitr serotypowane były przez National Reference Centre for Streptococcus (Edmonton, Alta.) Przy użyciu antyserum specyficznego typu.19 Genomowy DNA dwóch grup po 12 i 14 losowo wybranych izolaty z MIC cyprofloksacyny w ilości .g na mililitr i odpowiednio 2 .g na mililitr, a także wszystkie izolaty z MIC cyprofloksacyny co najmniej 4 .g na mililitr, badano za pomocą elektroforezy w żelu pulsacyjnym w polu po trawieniu SmaI w celu wyjaśnić związki klonalne. 20,21 Te izolaty dodatkowo scharakteryzowano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy i analizy polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych za pomocą HinfI dla najczęściej rozpoznawanych mutacji w parC i gyrA związanych z opornością na fluorochinolony, które zostały wcześniej opisane w Staphylococcus. aureus i Escherichia coli
[więcej w: ambroksol, buprenorfina, Leukocyturia ]
[podobne: lewoskrętna witamina c, lipaza lipoproteinowa, olx kepno ]