Upośledzony transport glukozy jako przyczyna zmniejszonej syntezy glikogenu mięśniowego stymulowanej insuliną w cukrzycy typu 2 cd

Ten ostatni wlew dostosowano okresowo w celu utrzymania stężenia glukozy w osoczu około 180 mg na decylitr (10 mmol na litr) w czasie trwania eksperymentu. Próbki krwi pobierano co 15 minut z rozgrzanej żyły ramienia do pomiarów insuliny w osoczu, glukozy i mannitolu oraz wzbogacania glukozy i mannitolu w 13C. Średnia szybkość wlewu glukozy, pomniejszona o szybkość wydalania glukozy z moczem, służyła jako miara szybkości metabolizmu glukozy w całym ciele. Protokół 2
W celu określenia względnej roli transportu glukozy i aktywności heksokinazy w syntezie glikogenu u pacjentów chorych na cukrzycę, czterech pacjentów badano ponownie w identycznych warunkach hiperglikemicznych, ale przy szybkości infuzji insuliny zwiększonej o współczynnik 10 (400 mU na metr kwadratowy na minutę).
Protokoły i 2
Zmiana stężenia glukozo-6-fosforanu w odpowiedzi na stymulację insuliną została zmierzona między 45 a 60 minutą po rozpoczęciu wlewu insuliny. Następnie zarejestrowano widma seryjne 13C NMR mięśnia w celu określenia szybkości syntezy glikogenu mięśniowego między 90 a 120 minutą po rozpoczęciu infuzji.9 Po 120 minutach wlew mannitolu (99 procent wzbogacony [1-13C] mannitol) i mierzono wewnątrzkomórkową glukozę w zakresie od 180 do 220 minut
Stężenia glukozy i insuliny w płynie śródmiąższowym
Po tym, jak pacjenci pościły przez noc, do mięśnia brzuchatego łydki wprowadzono dwie sondy w celu pobrania próbek płynu śródmiąższowego: sondę do mikrodializy (CMA60, CMA / Microdialysis, Solna, Szwecja) do pomiaru glukozy śródmiąższowej i sondę do mikroperfuzji o otwartym przepływie do pomiaru insuliny śródmiąższowej.22 Po trzygodzinnym okresie równoważenia przeprowadzono badanie z hiperglikemią i hiperinsulinemią, jak opisano powyżej.
Sondę do mikrodializowania perfundowano sztucznym płynem zewnątrzkomórkowym (chlorek sodu, 135 mmol na litr, chlorek potasu, 3 mmol na litr, chlorek magnezu, mmol na litr, chlorek wapnia, 1,2 mmol na litr, askorbinian, 200 .mol na litr; bufor fosforanu sodu, 2 mmol na litr, doprowadzony do pH 7,4) przy szybkości przepływu 0,3 .l na minutę z użyciem przenośnej pompy (CMA106, CMA / Microdialysis). Przy tej szybkości przepływu szybkość odzyskiwania za pomocą sondy do mikrodializy wynosi prawie 100%. 23 Sonda mikroperfuzji o otwartym przepływie była perfundowana przy szybkości przepływu .l na minutę. Wlot sondy z podwójnym prześwitem połączono z workiem zawierającym sztuczny płyn zewnątrzkomórkowy o tym samym składzie jak ten stosowany do mikrodializy, a wylot połączono z pompą perystaltyczną (Minipuls 3, Gilson, Middleton, Wis.). Próbki ścieków do pomiaru insuliny zbierano w odstępach 10-minutowych. Chociaż równowaga między perfuzatem i płynem śródmiąższowym nie jest całkowita przy tej szybkości przepływu (stężenie wypływu jest niższe niż stężenie śródmiąższowe), szybkości przepływu perfuzji były takie same we wszystkich badaniach. W związku z tym rozcieńczenie insuliny w ściekach było takie samo dla wszystkich pacjentów, a różnice w stężeniu insuliny w ściekach odzwierciedlały różnice w śródmiąższowych stężeniach insuliny.
Procedury analityczne
Glukozę w osoczu i wyciek z tkanki mięśniowej mierzono metodą oksydazy glukozy (Glucose Autoanalyzer II, Beckman Instruments, Fullerton, CA)
[podobne: Enterolnutrend, buprenorfina, amiodaron ]
[hasła pokrewne: lewoskrętna witamina c, lipaza lipoproteinowa, łupież tłusty ]