laryngolodzy bielsko

Rzadkie postaci TUNEL-pozytywne (różowe kółka) są wykrywane w mięśniu komorowym z sercowo operowanych lub sercowych tTAB (przegrody podstawnej), podczas gdy w aorcie wykrywany jest znacznie zwiększony sygnał. Pasek skali: 10 .m. (B) Pola mikroskopowe (10. 15 na sekcję), z których każda zawierała około 800 miocytów, oceniano za pomocą barwienia TUNEL (n = 30. 45 pól od każdej z 3 myszy w każdym punkcie czasowym) u myszy C57BL / 6. P = NS dla każdego punktu czasowego w porównaniu z fikcją. (C) drabiny DNA (strzałki) wskazujące na apoptozę w proksymalnej tkance aorty (Ao), ale nie LV, u zwierząt poddanych sTAB. Zerwanie Beclin zmniejsza autofagię kardiomiocytów in vivo. Autofagia jest mechanizmem wymaganym do normalnego rozwoju i, w zależności od kontekstu, adaptacyjną odpowiedzią na stres; w innych warunkach autofagia jest nieprzystosowana, przyczyniając się do patogenezy choroby i śmierci komórki (19, 27, 28). Nie wiadomo, czy autofagia serca wywołana przez stres hemodynamiczny jest adaptacyjna czy dezadaptacyjna. Homozygotyczne rozerwanie becliny jest zarodkowym letalnym, ale myszy poddane heterozygotycznej dezintegracji beclin (beclin + / a) są żywe, co przejawia zmniejszoną autofagię w wielu tkankach (12). Postawiliśmy hipotezę, że beclin + /. myszy również wykazywałyby zmniejszoną odpowiedź autofagiczną w sercu. Aby to przetestować, przekroczyliśmy linię autofagii-reportera za pomocą beclin + /. myszy i ilościową aktywność autofagiczną indukowaną krótkotrwałym niedoborem składników odżywczych. W tych eksperymentach odkryliśmy, że aktywność autofagiczna wywołana przez krótkoterminowe głodzenie została znacznie zmniejszona (P <0,05) przez heterozygotyczną inaktywację genu beclin (Figura 5, A i B). Figura 5. Emocja heterozygotyczna becliny zmniejsza autofagię kardiomiocytów. (A) Autofagia indukowana przez głodzenie (48 godzin), objawiająca się kropkami GFP-LC3, jest znacząco zmniejszona w beclin + /. kiery. Wszystkie zdjęcia zostały pobrane z przegrody podstawowej. Pasek skali: 35 .m. (B) Kwantyfikacja agregatów GFP na pole mikroskopowe (14 479. M2) w przegrodzie podstawowej wykazuje znacznie mniejszą aktywność autofagiczną w beclin + /. serca w odpowiedzi na głód w porównaniu z WT. n = 3. 5 mikroskopijnych pól w każdej z 3 myszy. (C) Indukcja autofagii przez przeciążenie ciśnieniowe (sTAB, 48 godzin) jest znacznie zmniejszona w beclin + /. serca w porównaniu z WT. Wszystkie zdjęcia pochodzą z podstawowej przegrody. Pasek skali: 35 .m. (D) Kwantyfikacja agregatów GFP na pole mikroskopowe (14 479. M2, podstawowa przegroda) wykazała znacznie mniejszą aktywność autofagiczną w beclin + /. serca narażone na stres hemodynamiczny. n = 3. 5 mikroskopijnych pól w każdej z 3 myszy. * P <0,05 w porównaniu do myszy a-MHC-GFP . LC3. Aby określić, czy dezaktywacja beclin zmienia autofagiczną odpowiedź na stres ciśnieniowy, ocenialiśmy autofagię kardiomiocytów w sercach poddanych sTAB (48 godzin). Odpowiadając podobnie do kardiomiocytów, które doświadczyły głodu, kardiomiocyty w beclin + /. tło zamanifestowało znacznie mniej punktów GFP-LC3. w porównaniu z kontrolkami beclin WT (Figura 5, C i D). Kwantyfikacja aktywności autofagicznej w tygodniu po sTAB ujawniła podobne spadki w beclin + /. myszy (punkty GFP-LC3 na 14,5 x 103 mm2: beclin + / a, 30 5, n = 3, WT, 66 a 12, n = 5, P <0,01). Podobnie jak w przypadku kontroli WT, przeciążenie ciśnieniem nie spowodowało autofagii w wątrobie, nerce lub mózgu beclin + /. myszy (dodatkowa Figura 4). Obfitość lizosomów zmniejszyła się w beclin + /. serca, zgodne ze zmniejszeniem strumienia przez ścieżki oczyszczania autofagii (dodatkowa Figura 5). Barwienie TUNEL i drabinka DNA nukleosomów nie ujawniły dowodów znaczącej aktywacji szlaków apoptotycznych w beclin + /. LV (dane nie pokazane); odkrycia te były bardzo podobne do naszych wyników w sercu WT poddanym sTAB [podobne: mastocytoza, leczo kalorie, legionelloza ]