Ehrlichia ewingii, nowo rozpoznany agent ludzkiej erlichiozy ad 6

8 leukocytów od pacjenta z zakażeniem E. chaffeensis, co potwierdzono przez sekwencjonowanie nukleotydowe produktu amplifikacji genu 16S rRNA. Żele sfotografowano pod ultrafioletowym oświetleniem za pomocą cyfrowego systemu obrazowania (model IS-1000, Alpha Innotech, San Leandro, CA). Testy PCR obejmowały także kontrole negatywne, w których woda została zastąpiona próbką; wszystkie konsekwentnie dawały wyniki ujemne (dane nie pokazane). Aby potwierdzić obecność E. ewingii, przeprowadzono test PCR specyficzny dla E. ewingii na produkcie testu PCR o szerokim zakresie od Pacjenta (dla którego nie było dostępnej próbki krwi) i na próbkach krwi od Pacjentów 2, 3 i 4, a także na próbkach krwi od 12 z 56 pacjentów z zakażeniem E. chaffeensis potwierdzonym przez PCR. Pozytywne wyniki uzyskano tylko w próbkach od pacjentów 1, 2, 3 i 4 (ryc. 2A, ryc. 2B, ryc. 2C i ryc. 2D). DNA E. ewingii wykryto również w próbkach krwi od dwóch psów posiadanych przez Pacjenta 3. Żaden pies nie był chory w momencie pobrania próbek krwi.
Badania serologiczne
Figura 3. Figura 3. Analiza Western Blot próbek surowicy do reaktywności z Ehrlichia chaffeensis i E. canis Antigens. Próbki surowicy analizowano przy użyciu antygenu przygotowanego z hodowli makrofagów psich DH82 zakażonych E. chaffeensis lub E. canis. Nieinfekowane komórki DH82 zastosowano jako kontrolę. Oczekuje się, że surowica od pacjentów z zakażeniem E. chaffeensis będzie wykazywać reaktywność z głównym antygenem o wielkości 28 kD E. chaffeensis, głównego antygenu 30 kD E. canis (wskazanego przez groty strzałek) lub obu; surowica od psów zakażonych E. ewingii wykazała reaktywność z antygenami 40 kd lub wyższymi, ale nie z głównymi antygenami 28 kD lub 30 kd E. chaffensis lub E. canis. Pokazano wyniki dla Pacjentów 1, 3 i 4; wyniki dla dwóch pacjentów zakażonych E. chaffeensis (pacjenci 5 i 6); dwa psy należące do Pacjenta 3; a trzeci pies eksperymentalnie zainfekowany E. ewingii.
Próbki surowicy od pacjentów 1, 3 i 4 zawierały przeciwciało IgG, które reagowało z E. chaffeensis w miana co najmniej 2048, 256 i 4096, odpowiednio, w pośrednim teście immunofluorescencyjnym. Analiza Western blot próbek uzyskanych od tych trzech pacjentów podczas rekonwalescencji, z użyciem E. chaffeensis i E. canis jako antygenów, ujawniła wzory wskazujące na zakażenie E. ewingii: próbki reagowały z antygenami co najmniej 40 kd, ale nie z główny antygen 28-kd E. chaffeensis lub główny antygen 30-kd E. canis 19-21 (fig. 3). Próbka surowicy od jednego z dwóch psów należących do Pacjenta 3 i od psa doświadczalnie zakażonego E. ewingii wykazywała ten sam wzór. Próbka surowicy od drugiego psa należącego do Pacjenta 3 miała schemat sugerujący zakażenie wieloma gatunkami Ehrlichia: wykazała reaktywność z antygenami o dużej masie cząsteczkowej, a także z antygenami 28 kD i 30 kd E. chaffensis i mi
[przypisy: sklerodermia, bimatoprost, bikalutamid ]
[patrz też: mefedron cena, olx jastrzebie, mielopatia ]